O-7 精子調整法の違いによる精子DNA fragmentation率の比較
2021年度 学術集会 一般演題（口頭発表）
発表者：鈴木 理恵1）・山上 一樹1）・寺田 堅斗2）・武内 大輝2）・岸 加奈子1）・古橋 孝祐1）・江夏 徳寿1）・岩﨑 利郎1）・前沢 忠志2）・池田 智明2）・塩谷 雅英1）
1） 英ウィメンズクリニック, 2） 三重大学大学院医学系研究科産科婦人科学
Abstract
【目的】
ARTの精子調整で用いられる密度勾配遠心分離法（以下：DGC）
は，精子に対する物理的ダメージやsperm DNA fragmentation
（以下：SDF）の増加が懸念されている．
以前当院では遠心分離を行わず運動良好精子を選別する装置「ミ
グリス」（株式会社 メニコン）とDGCとの比較検討を行うため，簡易SDF測定キットHalosperm®G2（ Halotech DNA）を使用した
（2019，日本IVF 学会）．その結果，SDF 値はミグリスの方が低値
であった．しかしながら，Halosperm®G2は染色後，目視による測
定となり，客観性に乏しい問題があった．そこで本検討では，客観
的な方法としてTUNEL 染色を行ったあとフローサイトメトリー（以下：FCM）で解析しSDF値を測定した．本研究では，以前のDGCとミグリスに加えて，遠心分離法（以下：Was h）の3群のSDFを比較検討したので報告する．
【方法】
2020年5月から10月に精液検査を受けた患者のうち，同意を得られた51症例の精液検体を用いて検討を行った．ミグリスには精液1.5mlを使用し，残りはDGC・Washへそれぞれ供試した．精子調整には，Universal IVF Medium（以下：UIM， Origio）を用いた．DGCではSepa Sperm（株式会社 北里コーポレーション）を用いて200G×10分で2層（80％，40％）密度勾配遠心分離法を施行し，上清除去後UIMを用いて200G×5分遠心分離後，調整液を回収した．WashはUIMに精液を混濁し200G×20分で遠心分離を行った．調整法ごとに精子数2×10^6個になるように一部を回収してTUNEL染色を行った後，FCM で解析し比較検討を行った．
【結果】
51症例の平均患者年齢は36.7歳，原精液所見は液量が3.5ml，精子濃度が114.0×10^6個/ml，運動率は59.3 ％であった．平均SDF 値は原精液18.4 ％，DGC 16.3 ％， ミグリス 7.9 ％，Wash20.7％であり，ミグリスが有意に低かった．原精液からみたSDF 値の増減率はDGC 11.2 ％ 減少， ミグリス54.1 ％ 減少，Wash は14.7％増加となった．各方法それぞれで増減率を比較したところ，ミグリスが他2群と比較して有意に低値であった．
【結論】
SDF値はミグリスで有意に低下を認めた．一方，DGCとWashで
は検体間で遠心の影響により増減したが，有意差は認められなかっ
た．またミグリスはDGCとWashにおけるSDF値の増減率と比較し
ても有意に低値となった．FCM 法においても，ミグリスはDGC及
びWashよりもSDF 値が低下することが示された．以上より，ミグリ
スはDGC及びWashと比較して，より精子へのダメージが少ない調
整法であることが示唆された．
