O-24 顆粒膜細胞で発現上昇するSREBPは，排卵期のプロゲステロン産生に必須である
2020年度 学術集会 一般演題（口頭発表）
発表者：中西 寛弥１） ・田中 里沙2） ・島田 昌之3） ・山下 泰尚１)・2）
1）県立広島大院総合学術 2）県立広島大生命環境 3）広島大院統合生命科学
Abstract
【目的】
後期胞状卵胞の顆粒膜細胞にLH が作用するとEGF-like factorの発現を介してプロゲステロン（P4）を産生し， 排卵が誘導される．P4は， 肝臓で新規合成されるコレステロール（Cho）を基質とすると考えられてきたが，hCG 刺激後の卵巣のトランスクリプトーム解析結果から， 肝 臓のCho 合成経路に必須の転写因子（Srebp）の発現を見出した．本研究では，hCG刺激前後の顆粒膜細胞におけるSREBPとその制御因子 （SCAP）の発現とそれらの役割を検討した．
【方法】
実験1. 3週齢の C57BL/6雌マウスに PMSG 投与48時間（h）後に hCGを投与し顆粒膜細胞（GC)を回収した．GCのSrebp-1, Srebp-2, Scap および Cho 合成酵素（Hmgcr, Cyp51, Dhcr7）の経時的発現を調べた．またSREBP-1，SREBP-2，SCAPタンパク質の発現と局在を調べた．実験2. PMSG 投与 42h後にSREBP-SCAP複合体形成阻害剤（Fatostatin; Fato）を投与し，6h後にhCGを投与した．hCG 投与 2h後と12h後の卵巣を回収し，GCのCho合成酵素発現（2h），Cho量 （2h），P4量（12h）を調べた．実験3. PMSG 投与48h後のGCを回収し， Scap siRNAを導入後，EGF-like factor （AREG） 添加培地で 12h， 16h 培養した．GCの Cho合成酵素群の mRNA発現（12h）とCho局 在の蛍光像（12h），P4量（16h）を検出した．実験4. 実験2と同様に Fato 処理した6h 後に hCGあるいは hCGとP4を投与し，16h 後の卵 管の排卵数と48h後の黄体数とその形態を調べた．
【結果】
実験1. Srebp-1，Srebp-2，Scap mRNA発現，SREBP-1，SREBP-2 発現は PMSG 投与48h 後からhCG 投与後に高い発現量を示し，GC に局在していた．Cho 合成酵素発現は hCG 投与後に有意に増加した． 実験2. Fato 処理によりCho 合成酵素発現，Cho量，P4量は有意に低 下した．実験3. Scap siRNA 処理によりCho合成酵素発現，Cho量， P4量は有意に減少した．実験4. Fato 処理により排卵数， 黄体数は減 少し，排卵不全を呈したが，この低下は P4投与により回復した．
【考察】
Fato 処理とScap siRNA 処理によりCho 酵 素群の mRNA 発現， Cho量，P4量が低下したことから，SREBPとSCAPは， 排卵刺激後 の速やかなCho 合成とP4産生に重要であることが明らかになった．さらにFato 処理は排卵不全を呈したことから，SREBPとSCAPにより 誘導されるCho 合成経路は排卵に必須であり， この経路の破綻は排卵不全の要因となると考えられた．
