O-23 Neurotensin は ERK1/2 系 の持続的リン酸化を促進し排卵を誘起する
2020年度 学術集会 一般演題（口頭発表）
発表者：岡本 麻子１・2） ・島田 昌之3） ・山下 泰尚1）
1）県立広島大院総合学術研究科 2）倉敷芸術科学大生命科学部 3）広島大院統合生命科学研究科
Abstract
【目的】
LHサージ刺激後の顆粒膜細胞が放出するEGF-like factorは卵丘細胞のEGF受容体を介してERK1/2を活性化し排卵を誘導する．当研究グ ループでは，野生型マウスと卵巣特異的Erk1/2欠損マウスの排卵期顆粒 膜細胞におけるアレイデータベースの比較解析から，ERK1/2依存的に発現する分泌因子の探索を行った．その結果，神経ペプチドのNeurotensin （NTS）を見出したことから，本研究ではNTSとその受容体（NTSR1）の発現と機能解析を行った．
【方法】
実験1: PMSG/hCGを投与した 3週齢のC57BL/6雌マウスから卵巣， 顆粒膜細胞（GC）， 卵丘細胞（CC）を各時間に回収し，NTS および NTSR1の遺伝子とタンパク質発現， 局在を調べた．実験2: マウスに PMSG/hCGまたは hCG+SR（NTSR1阻害剤）投与し，排卵数，産仔数，黄体数を調べた．実験3: PMSG/hCGまたは PMSG/hCG+SRを投与 したマウスからCCを回収し，経時的ERK1/2リン酸化パターンを比較した．実験4: PMSG/hCGおよび PMSG/hCG+SRを投与したマウス から GC および CCを回収し，GC の EGF-like factors（Areg，Btc， Ereg，Nrg1）とCCのErBbs（Erbb1，Erbb2，Erbb3，Erbb4）の発現 を比較した．
【結果】
実験1: Nts mRNAはhCG刺激前まではGCとCCで低値であったが， hCG 刺激4h 後以降に両細胞で有意に上昇したが，Ntsr1 mRNAは GCとCCで恒常的に発現していた．NTS 量は排卵刺激後に増加し， NTS，NTSR1タンパク質も排卵刺激後の GC，CCに局在していた． 実験2: 排卵数， 産仔数， 黄体数は SR 投与により減少した．実験3: hCG 投与したCCでは排卵時まで継続的にERK1/2のリン酸化が認め られたが，hCG+SRでは継続的なERK1/2リン酸化は認められなかっ た．実験4: GCでのEregとNrg1，CCのErbb2とErbb3 mRNA発現 はSRにより完全に抑制された．
【考察】
本研究の結果，NTSはGCのEGF-like factorのうちEREGとNRG1， CCのEGF受容体のうちErBb2とErBb3の発現をそれぞれ亢進し，排卵期間中の継続したERK1/2のリン酸化を誘導する因子であることが明らか になった．さらに，この結果，受精能を有する卵の成熟と排卵が誘導され ると考えられた．
